Amidasi (AMD)
Enzimi:Sono catalizzatori biologici macromolecolari, la maggior parte degli enzimi sono proteine
Amidasi:Catalizzare l'idrolisi di varie ammidi alifatiche e aromatiche endogene ed estranee trasferendo un gruppo acilico all'acqua con la produzione di acidi liberi e ammoniaca.Gli acidi idrossamici e altri acidi organici sono ampiamente usati come farmaci perché sono costituenti di fattori di crescita, antibiotici e inibitori del tumore.Le amidasi possono essere suddivise in acilasi di tipo R e di tipo S in base alla stereoselettività del catalizzatore.
Oltre a catalizzare l'idrolisi delle ammidi, l'ammidasi può anche catalizzare reazioni di trasferimento acile in presenza di co-substrati come l'idrossilammina.
L'amidasi con diverse fonti ha una specificità del substrato diversa, alcune di esse possono idrolizzare solo ammidi aromatiche, alcune possono idrolizzare solo ammidi alifatiche e alcune idrolizzano α-o ω-amminoammidi.La maggior parte delle ammine ha una buona attività catalitica solo per le ammidi aromatiche acicliche o semplici, ma per gli aromatici complessi, le ammidi eterocicliche, in particolare le ammidi con sostituenti orto, sono generalmente a bassa attività (solo pochi enzimi mostrano effetti catalitici migliori).
Meccanismo catalitico:
| Enzimi | Codice prodotto | Codice prodotto |
| Enzima in polvere | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | un set di 19 amidasi, 50 mg ciascuno 19 articoli * 50 mg / articolo o altra quantità |
| Kit di screening (SynKit) | ES-AMD-1900 | un set di 19 amidasi, 1 mg ciascuno 19 articoli * 1 mg / articolo |
★ Elevata specificità del substrato.
★ Forte selettività chirale.
★ Alta efficienza di conversione.
★ Meno sottoprodotti.
★ Condizioni di reazione mite.
★ Rispettoso dell'ambiente.
➢ Lo screening enzimatico dovrebbe essere effettuato per substrati specifici a causa della specificità del substrato e ottenere un enzima che catalizza il substrato target con il miglior effetto catalitico.
➢ Non entrare mai in contatto con condizioni estreme quali: alta temperatura, alto/basso pH e solventi organici ad alta concentrazione.
➢ Normalmente, il sistema di reazione dovrebbe includere substrato, soluzione tampone (il pH di reazione ottimale dell'enzima).Co-substrati come l'idrossilammina dovrebbero essere presenti nel sistema di reazione di trasferimento acile.
➢ AMD dovrebbe essere aggiunto per ultimo nel sistema di reazione con pH e temperatura di reazione ottimali.
➢ Tutti i tipi di AMD hanno varie condizioni di reazione ottimali, quindi ognuno di essi dovrebbe essere ulteriormente studiato individualmente.
Esempio 1(1):
Attività di idrolisi su diversi substrati ammidici
| Substrato | Attività specifica μmol min-1mg-1 | Substrato | Attività specifica μmol min-1mg-1 |
| acetammide | 3.8 | ο-OH benzammide | 1.4 |
| propionammide | 3.9 | p-OH benzammide | 1.2 |
| lattammide | 12.8 | ο-NH2benzammide | 1.0 |
| Butiramide | 11.9 | p-NH2benzammide | 0.8 |
| Isobutiramide | 26.2 | ο-Toluammide | 0.3 |
| Pentanammide | 22.0 | p-Toluammide | 8.1 |
| Esanammide | 6.4 | Nicotinamide | 1.7 |
| Cicloesanammide | 19.5 | isonicotinamide | 1.8 |
| acrilammide | 10.2 | picolinammide | 2.1 |
| Metacrilamide | 3.5 | 3-fenilpropionammide | 7.6 |
| Prolinammide | 3.4 | Indol-3-acetammide | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
La reazione è stata condotta in una soluzione tampone di fosfato di sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
| Amidi | Idrossilamina | idrazina |
| acetammide | 8.4 | 1.4 |
| propionammide | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramide | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
La reazione è stata condotta in una soluzione tampone di fosfato di sodio 50 mM, pH 7,5, a 70 ℃.
Concentrazione di reagente correlata: ammidi, 100 mM(benzammide, 10 mM);idrossilammina e idrazina, 400 mM;enzima 0,9 μM.
Esempio 2(2):
Esempio 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Estremofili, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Biochimica di processo, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Chimica bioorganica, 2017, Disponibile online 7.
